Achyrocline satureioides (Lam) DC extracts acting as enzyme modulators: digestion, inflammation, and hemostasis / Extratos de Achyrocline satureioides (Lam) DC atuando como moduladores enzimáticos: digestão, inflamação e hemostasia

Achyrocline satureioides is popularly known for its richness in phenolic compounds and medicinal properties (anti-inflammatory, analgesic, and hepatoprotective). The present study aimed at broadening the knowledge about the pharmacological potential exerted by the aqueous and ethanolic extracts of A. satureioides. These extracts were characterized by HPLC and tested for their modulatory action on phospholipases A2 and proteases of snake venoms. In addition, they were tested on the activities of digestive enzymes. Snake venoms were used as tools since they have enzymes with high functional and structural homology to human enzymes. The results demonstrate that the extracts of A. satureioides act as enzymatic inhibitors or potentiators, interfering in processes related to the hemostasis, such as coagulation and thrombus dissolution. In addition, the anti-genotoxic activity and inhibitions exerted on digestive enzymes suggests their potential use in the prevention and/or treatment of several pathologies. New studies could provide information on how the compounds present in the extracts and the different enzymes interact.

A Achyrocline satureioides é popularmente conhecida por sua riqueza em compostos fenólicos e por suas propriedades medicinais (anti-inflamatória, analgésica e hepatoprotetora). No presente estudo, com o objetivo de ampliar o conhecimento sobre o potencial farmacológico exercido por esses extratos, os extratos aquoso e etanólico de A. satureioides foram caracterizados por HPLC e testados quanto à sua ação modulatória sobre as fosfolipases A2 e proteases de peçonhas de serpentes. Além disso, também foram testados em atividades de enzimas digestivas. As peçonhas de serpentes foram usadas como ferramentas por apresentarem enzimas com alta homologia funcional e estrutural às humanas. Os resultados demonstram que os extratos de A. satureioides atuam como inibidores ou potencializadores enzimáticos, interferindo em processos relacionados à hemostasia, como coagulação e dissolução do trombo. Além do mais, destacam seu potencial antigenotóxico e as inibições exercidas sobre as enzimas digestivas direcionando seu potencial de uso na prevenção e/ou tratamento de diversas patologias. Novos estudos poderão fornecer informações sobre os mecanismos de interação entre os compostos presentes nos extratos e as diferentes enzimas.

Sodium trimetaphosphate combined to calcium as a strategy to improve dentin-bonding interface / Trimetafosfato de sódio associado ao cálcio como uma estratégia para melhorar a interface adesiva da dentina

Objective: The aim of this study was to evaluate the effect of STMP as biomimetic analog of dentin matrix on the dentin bond strength submitted to artificial cariogenic challenge over time. Material and Methods: The total number of teeth used in the experiment was 60 teeth, which were divided into 6 groups (n = 10). Of these total amount, 10 teeth were not submitted to the artificial cariogenic challenge (ACC), serving as control group (Sound Dentin - SD) while the other 50 were submitted to an ACC (7d/37ºC), being treated with treatment solutions according to each group: SD- deionized water/sound dentin, CD- deionized water/ artificial caries dentin, GIII- STMP, GIV- STMP + Ca(OH)2, GV- STMP + NaF, and GVI- NaF. After treatments (24h), the specimens were restored (Adper Single Bond Universal + Filtek Z250), to obtain resin­dentin sticks with a cross sectional area of 0.8mm2, approximately. Two-third of these sticks were stored in artificial saliva (37°C) for analyzes after 6 and 12 months. The 1/3 remains were subjected to µTBS test (baseline). Data were analyzed by two-way ANOVA and Tukey tests (p<0.05). Results: In general, the highest µTBS values were obtained in sound condition (SD), while the artificial caries condition (CD) determined minimum values. Groups treated with NaF (with or without STMP- GV and GVI) were not able to improve adhesion over time. Only the use of STMP + Ca(OH)2(GIV) improved the µTBS compared to the others caries-challenged dentin after 1 year. The adhesive failure pattern was predominant in all time. Conclusion: The use of the STMP associated with Ca(OH)2 seems to be a viable therapeutic strategy conciliating the biomimetizing capacity to the adhesive process satisfactorily even its performance is not superior to initial condition (AU)

Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do STMP como análogo biomimético da matriz dentinária na resistência de união à dentina submetida a desafio cariogênico artificial ao longo do tempo. Material e Métodos:foram utilizados um total de 60 dentes neste experimento, os quais foram divididos em 6 grupos (n = 10). Desse total, 10 dentes não foram submetidos ao desafio cariogênico artificial (DCA), servindo como grupo controle (Dentina Hígida - DH) enquanto os outros 50 foram submetidos ao DCA (7d / 37ºC), sendo tratados com soluções de tratamento específicas para cada grupo: DH- água deionizada / dentina hígida, DC- água deionizada / dentina submetida ao DCA, GIII- STMP, GIV- STMP + Ca(OH)2, GV- STMP + NaF e GVI- NaF. Após os tratamentos (24h), os corpos-de-prova foram restaurados (Adper Single Bond Universal + Filtek Z250), para obtenção de palitos de resina-dentina com área transversal de aproximadamente 0,8mm2. Dois terços desses palitos foram armazenados em saliva artificial (37°C) para análises após 6 e 12 meses. Os outros 1/3 foram submetidos ao teste µTBS (baseline). Os dados foram analisados por ANOVA a dois fatores e testes de Tukey (p <0,05). Resultados:Em geral, os maiores valores de µTBS foram obtidos em condição hígidas (DH), enquanto a condição subtmetidas ao DCA determinou os menores valores. Os grupos tratados com NaF (com ou sem STMP associado -GV e GVI) não foram capazes de melhorar a resistência de união, ao longo do tempo. Somente o uso de STMP + Ca (OH)2(GIV) melhorou o µTBS em comparação com as outras condições desafiadas por cárie após 1 ano. O padrão de falha adesiva foi predominante em todos os tempos. Conclusão: O uso do STMP associado ao Ca (OH)2 parece ser uma estratégia terapêutica viável conciliando a capacidade biomimetizante ao processo adesivo de forma satisfatória mesmo que seu desempenho não seja superior à condição inicial.(AU)

Cost-effectiveness analysis is a mandatory strategy for health systems: evidence from a study involving therapies for hepatitis C / Análise de custo-efetividade é uma estratégia essencial para os sistemas de saúde: as evidências de um estudo sobre terapias para hepatite C / El análisis de coste-efectividad es una estrategia esencial para los sistemas de salud: evidencias de un estudio sobre terapias para hepatitis C

Abstract: Cost-effectiveness analysis is essential in health decision making. Several countries use it as synthesis of evidence to incorporate health technologies. The protease inhibitors (PI) boceprevir (BOC) and telaprevir (TVR) are indicated for chronic hepatitis C treatment and were incorporated in guidelines worldwide. Pre-marketing clinical trials showed higher sustained virological response rates in relation to previous therapies, but the incorporation of PIs generated a significant financial impact. The aim of this study was to discuss the relevance of cost-effectiveness analysis through a study that involved the inclusion of PIs in a clinical protocol. The analysis was part of a real-life study that included patients infected with hepatitis C virus genotype 1 treated in a tertiary university hospital in Brazil. Triple therapies (TT) with ribavirin (RBV), peginterferon α-2a (Peg-INF α-2a) and BOC or TVR were compared to dual therapy with RBV and Peg-INF α-2a. Sensitivity analysis of the cost-effectiveness ratio indicated an 88.2% chance of TTs presenting a higher cost per cure. The incremental cost-effectiveness ratios (ICER) exceeded the Brazilian gross domestic product (GDP) per capita by three times in all proposed scenarios. The sensitivity of ICER showed an 88.4% chance of TT not being cost-effective. The impact of PI incorporation was negative and the conduct about this could have been different if a previous cost-effectiveness analysis had been conducted.

Resumo: A análise de custo-efetividade tem sido essencial para a tomada de decisões em saúde. Diversos países utilizam esse tipo de análise como síntese das evidências para incorporar as tecnologias em saúde. Os inibidores de protease (IPs) boceprevir (BOC) e telaprevir (TVR) são indicados para o tratamento da hepatite C crônica e foram incorporados nas diretrizes internacionais. Os ensaios clínicos pré-marketing demonstraram taxas mais altas de resposta virológica sustentada em relação às terapias anteriores, mas a incorporação dos IPs gerou um impacto financeiro significativo. O estudo teve como objetivo discutir a relevância da análise de custo-efetividade, através de um estudo que envolveu a inclusão de IPs em um protocolo clínico. A análise fez parte de um estudo de vida real que incluiu pacientes com infecção pelo vírus da hepatite C, genótipo 1, tratados em um hospital universitário terciário no Brasil. As terapias triplas (TTs) com ribavirina (RBV), peg-interferon α-2a (Peg-INF α-2a) e BOC ou TVR foram comparadas às terapias duplas com RBV e Peg-INF α-2a. A análise de sensibilidade da custo-efetividade indicou odds de 88,2% de TTs apresentarem custo mais elevado por paciente curado. Em todos os cenários propostos, as razões de custo-efetividade incremental (ICERs) superaram em três vezes o produto interno bruto (PIB) per capita brasileiro. A sensibilidade da ICER mostrou probabilidade de 88,4% das TTs não serem custo-efetivas. O impacto da incorporação dos IPs foi negativo, e a conduta teria sido diferente se tivesse sido realizada uma análise prévia de custo-efetividade.

Resumen: El análisis de coste-efectividad ha sido esencial para la toma de decisiones en salud. Diversos países utilizan este tipo de análisis como síntesis de evidencias para incorporar tecnologías en salud. Los inhibidores de proteasa (IPs) boceprevir (BOC) y telaprevir (TVR) se indican para el tratamiento de la hepatitis C crónica y fueron incorporados en directrices internacionales. Los ensayos clínicos pre-marketing demostraron tasas más altas de respuesta virológica sostenida, respecto a las terapias anteriores, pero la incorporación de los IPs generó un impacto financiero significativo. El objetivo del estudio fue discutir la relevancia del análisis de coste-efectividad, a través de un estudio que implicó la inclusión de IPs en un protocolo clínico. El análisis formó parte de un estudio de vida real que incluyó a pacientes con infección por el virus de la hepatitis C, genotipo 1, tratados en un hospital universitario terciario en Brasil. Las terapias triples (TTs) con ribavirina (RBV), peg-interferon α-2a (Peg-INF α-2a) y BOC o TVR se compararon con las terapias dobles con RBV y Peg-INF α-2a. El análisis de sensibilidad del coste-efectividad indicó odds de 88,2% de que las TTs presentaran un coste más elevado por paciente curado. En todos los escenarios propuestos, las razones de coste-efectividad incremental (ICERs) superaron tres veces el producto interno bruto (PIB) per cápita brasileño. La sensibilidad de la ICER mostró una probabilidad de que un 88,4% de las TTs no eran costo-efectivas. El impacto de la incorporación de los IPs fue negativo, y el resultado habría sido diferente si se hubiese realizado un análisis previo de coste-efectividad.

Hepatite C e as novas estratégias de tratamento: revisão deliteratura / Hepatitis C and the new treatment strategies: literature review

As hepatites virais são uma das maiores causas de transplantes hepáticos no mundo, com destaque para hepatite C (HCV), com mais de 240 milhões de pessoas infectadas. A história da HCV é marcada pela evolução silenciosa da doença, afetando negativamente o diagnóstico, sendo que os primeiros sintomas manifestam-se apenas na fase aguda e avançada da doença, comprometendo a eficácia do tratamento. Estudos apontam que cerca de 350 mil pessoas perdem a vida anualmente em decorrência da doença. O tratamento dos casos de HCV era feito pela combinação dos medicamentos interferon e ribavirina, no entanto, essa combinação tem como um grande problema a limitação de seu uso em alguns pacientes e, principalmente, seus intensos efeitos colaterais. Esse estudo se dedicou a apresentar os novos tratamentos, através de revisão de literatura, com coleta de dados em Pubmed, SciElo, entre outros bancos de dados, servindo como um informativo às pessoas doentes e seus familiares. A revisão apontou que uma avaliação da gravidade da doença hepática deve ser feita com a finalidade de fornecer subsídios ao processo de decisão sobre o regime de tratamento mais adequado. Essas novas terapias foram introduzidas e demonstraram melhores resultados, perfil de segurança e eficácia.

Viral hepatitis is one of the biggest causes of liver transplants in the world, with hepatitis C (HCV), with more than 240 million people infected all over the world. The history of HCV is marked by the silent evolution of the disease, negatively affecting the diagnosis, and the first symptoms manifest only in the acute and advanced stage of thedisease, compromising the effectiveness of the treatment. Studies indicate that about 350,000 people die each year from the disease.The treatment of HCV cases was made by the combination of interferon and ribavirin, however, this combination has a major problem limiting its use in some patients and especially its intense side effects. This study was dedicated to presenting the new treatments, through literature review, with data collection in Pubmed, SciELO, among other databases, serving as an informative to sick people and their families. The review pointed out that an assessment of the severity of liver disease should be done in order to provide input to the decision process o n the most appropriate treatment regimen. These new therapies were introduced and demonstrated better results, safety profile and efficacy

The use of sodium trimetaphosphate for matrix metalloproteinase inhibition, remineralization and bonding to dentin / O uso de trimetafosfato de sódio sobre a inibição de metaloproteinases e na remineralização e adesão à dentina

The adhesive process to dentin substrate depends on the condition determined by the combined action of the mineral loss and the endogenous enzymes activity. Thus, considering a more complete therapeutic approach, sodium trimetaphosphate (STMP) may be a novel strategy that conciliates the remineralization potential to the promotion of dentin strengthening and its stability, possibly directing mineral nucleation and controlling the rate of biodegradation. In this study, the effect of STMP was evaluated in 2 studies. In study 1, different concentrations of STMP (0.5, 1.5, 3.5 and 5%) were investigated to assess their anti-proteolytic capacity on human purified MMPs-2 and -9 by zymography. Afterwards, only the concentrations (1.5, 3.5 and 5%) that showed total inhibition of both MMPs were used to evaluate their remineralizing capacity in dentin substrate submitted to artificial cariogenic challenge, through surface hardness (SH) and cross-sectional hardness (CSH). In study 2, based on the previous results, the capacity of the 1.5% STMP associated or not with NaF or Ca(OH)2 solutions in improving the dentin bond strength of a universal adhesive system was evaluated by the microtensile test . Thus, these studies suggest that 1.5% STMP is an effective inhibitor of collagen degradation mediated by purified human MMPs-2 and -9. In addition, demineralized and treated dentin with 1.5% STMP supplemented with Ca(OH)2 may induce remineralization. Thus, the use of STMP can be introduced as a new strategy that combines enzymatic inhibition and remineralization potential, reestablishing favorable conditions to affected dentin. These evidences support perspectives of therapies to restructure dentin and propose feasible and promising clinical strategies.(AU)

O processo adesivo ao substrato dentinário depende da condição determinada pela ação combinada da perda mineral e atividade de enzimas endógenas. Deste modo, considerando uma abordagem terapêutica mais completa, o trimetafosfato de sódio (STMP) pode ser uma estratégia inovadora que concilia o potencial remineralizador à promoção do fortalecimento da dentina e sua estabilidade, possivelmente direcionando a nucleação mineral e controlando a taxa de biodegradação. Neste trabalho, o efeito do STMP foi avaliado em 2 estudos. No estudo 1, diferentes concentrações de STMP (0,5; 1,5; 3,5 e 5%) foram investigadas para avaliar sua capacidade anti-proteolítica sobre as MMPs-2 e -9 purificadas humanas, por zimografia. Posteriormente, somente as concentrações (1,5; 3,5 e 5%) que apresentaram capacidade de inibição total de ambas MMPs foram utilizadas para avaliar sua capacidade remineralizadora em substrato dentinário submetido ao desafio cariogênico artificial, através da dureza de superfície (DS) e longitudinal (DL). No estudo 2, baseado nos resultados anteriores, foi avaliada a capacidade do STMP à 1,5% associado ou não a soluções de NaF ou Ca(OH)2 em melhorar a resistência de união à dentina de um sistema adesivo universal pelo teste de microtração. Desta forma, estes estudos sugerem que o STMP à 1,5% apresenta-se como um inibidor eficaz da degradação do colágeno mediada por MMPs-2 e -9 humanas purificadas. Além disso, a dentina humana desmineralizada e tratada com STMP à 1,5% suplementada com Ca(OH)2 pode induzir à remineralização. Assim, o uso de STMP pode ser introduzido como uma nova estratégia que combina inibição enzimática e potencial de remineralização, reestabelecendo condições favoráveis a partir de uma dentina afetada. Estas evidências sustentam perspectivas de terapias para reestruturar a dentina e propor estratégias clínicas factíveis e promissoras.(AU)

Efeito do inibidor de proteinase de origem vegetal EcTI, sobre a inflamação pulmonar alérgica crônica em camundongos Balb/c / Effect of proteinase inhibitor of plant origin EcTI in an experimental model of chronic allergic pulmonary inflammation in Balb/c mice

A prevalência de asma tem crescido e a maioria dos pacientes com asma grave não obtém o controle total dos sintomas com as terapias disponíveis, fazendo-se necessária a busca por novas alternativas terapêuticas. Inibidores de proteinases têm sido estudados como tratamento de processos inflamatórios, dentre eles o Enterolobium contortisiliquum Tripsin Inhibitor (EcTI) OBJETIVO: Avaliar se o inibidor de proteinase EcTI modula a hiperresponsividade brônquica à metacolina, inflamação, remodelamento e estresse oxidativo nas vias aéreas e septos alveolares em um modelo experimental de inflamação pulmonar alérgica crônica. MÉTODOS: Vinte e quatro camundongos Balb/c machos, entre seis e sete semanas de vida, pesando em media 25 g foram divididos em quatro grupos: C (controle), OVA (sensibilizados com ovalbumina, 50 ug intraperironeal (i.p) nos dias 0 e 14 e desafiados nos dias 22, 24, 26, 28); C+EC (controle tratados com EcTI (2 mg/kg/i.p) nos dias 22 a 28); OVA+EC (sensibilizados e desafiados com ovalbumina e também tratados com EcTI (2 mg/kg -i.p) nos dias 22 a 28). No dia 29, foram realizadas realizadas: (i) hiperresponsividade à metacolina e obtidas as respostas máximas de resistência e elastância do sistema respiratório; (ii) análise histopatológica do pulmão para quantificação de eosinófilos, fibras colágenas e elásticas nas vias aéreas (VA) e nos septos alveolares (SA); e (iii) imunohistoquímica para quantificação de células positivas para IFN-y, IL-4, IL-5, IL-13, MMP-9, TIMP-1, TGF-beta, iNOS, NF-kB e fração de volume de isoprostano nas VA e nos SA. Uma semana após o dia 29 foi realizada a técnica de anafilaxia cutanea passiva(PCA) para quantificar IgE e IgG1. A significância foi considerada quando p < 0,05. RESULTADOS: Houve aumento de todos os parâmetros avaliados no grupo OVA em relação ao grupo controle (p < 0,05). Houve atenuação da resposta máxima de Rrs e Ers no grupo OVA+EC comparado as grupo OVA (p < 0,05). O tratamento...

The number of cases of asthma has grown in recent decades. People who have severe asthma are likely to have more attacks and are at greater risk of a fatal attack, which propose to keep up global attention and keep approaching for advances in asthma care. Proteinase inhibitors of vegetable origin have been studied as a modulator of inflammatory responses and diseases. Among these inhibitors is Enterolobium contortisiliquum Trypsin Inhibitor (EcTI). AIMS: To evaluate the effects of EcTI in pulmonary mechanical, eosinophilic recruitment, inflammatory cytokines, remodeling of extracellular matrix and oxidative stressin an experimental model of chronic allergic pulmonary inflammation. METHODS: Twenty-four young adult male pathogen-free mice BALB/c (6-7 weeks old, 25-30g) were divided into 4 groups: C (control), OVA (sensitized with ovalbumin, 50 ug intraperitoneal (i.p), on days 0 and 14 and challenged with ova 1%, on days 22, 24, 26, 28); C+EC (control treated with EcTI- 2 mg/kg/i.p. from days 22 to 28); OVA+EC (sensitized and challenged with ovalbumin and treated with EcTI (2 mg/kg/i.p) from days 22 to 28). At day 29, we performed: (i) Bronchial hyperresponsiveness to methacholine and obtained the maximum response of resistance (Rrs) and elastance (Ers) of the respiratory system; (ii) lung histopathological analysis by morphometry to quantify eosinophils, collagen and elastic fibers volume fraction in airways; and (iii) immunohistochemistry to quantify IFN-y, IL-4, IL-5, IL-13, MMP-9, TIMP-1, TGF-, iNOS, NF-kB positive cells and isoprostane volume fraction in airways. One week after the day 29 we performed PCA technique to quantify IgE and IgG1 antibodies. Significance was considered at p < 0.05. RESULTS: The EcTI treatment in the ovalbumin-sensitized animals attenuated the maximal response of resistance and elastance of respiratory system after methacholine, the number of eosinophils, IL-4, IL-5, IL-13, IFN-y, NF-kB and iNOS-positive cells,...

Health-Related Quality of Life in patients with hepatitis C in double and triple therapy / Calidad de vida relacionada con la salud en pacientes con hepatitis c en terapia doble y triple / Qualidade de vida relacionada à saúde em pacientes com hepatite C em terapia dupla e tripla

Abstract OBJECTIVE Comparing Health-Related Quality of Life (HRQoL) scores in patients with chronic hepatitis C undergoing double and triple antiviral therapy and analyzing possible factors related to HRQoL. METHOD HRQoL was assessed using the Short Form 36 and Chronic Liver Disease Questionnaire, which were applied at baseline and at weeks 4, 12 and 16 of treatment to 32 patients divided into two groups: double therapy with pegylated interferon (IFN-PEG) and ribavirin, and triple therapy with PEG-IFN, ribavirin and telaprevir. RESULTS The reduction of HRQoL was greater in patients receiving triple therapy compared to those treated with two drugs, the most critical time is at 12 weeks in both groups. After removal of telaprevir, the triple therapy group significantly improved their HRQoL scores. Anxiety and depression before treatment, employment status and race are significantly related to diminished HRQoL. CONCLUSION Patients undergoing double and triple therapy have diminished HRQoL indexes, but the addition of telaprevir chooses a more significant decrease.

Resumen OBJETIVO Comparar los puntajes de Calidad de Vida Relacionada con la Salud (CVRS) en pacientes con hepatitis C crónica sometidos a la terapia antiviral doble y triple y analizar los posibles factores relacionados con la CVRS. MÉTODO La CVRS fue evaluada utilizando el Short Form 36 y elChronic Liver Disease Questionnaire , que fueron aplicados antes y en las semanas 4, 12 y 16 de tratamiento, en 32 pacientes divididos en 2 grupos: terapia doble con interferón pegilado (IFN-PEG) y ribavirina, y triple con IFN-PEG, ribavirina y telaprevir. RESULTADOS La reducción de la CVRS fue mayor en pacientes en terapia triple cuando comparados con los tratados con dos drogas, siendo el momento más crítico la 12ª semana en ambos grupos. Después de la retirada del telaprevir, el grupo de terapia triple mejoró de modo significativo los puntajes de CVRS. Ansiedad y depresión en el pre tratamiento, situación de empleo y raza se mostraron relacionados con la reducción de la CVRS. CONCLUSIÓN Pacientes sometidos a la terapia doble y triple presentan reducción de los índices de CVRS, pero la adición del telaprevir les proporciona una caída más expresiva.

Resumo OBJETIVO Comparar os escores de Qualidade de Vida Relacionada à Saúde (QVRS) em pacientes com hepatite crônica C submetidos à terapia antiviral dupla e tripla e analisar os possíveis fatores relacionados à QVRS. MÉTODO A QVRS foi avaliada utilizando o Short Form 36 e oChronic Liver Disease Questionnaire , que foram aplicados antes e nas semanas 4, 12 e 16 de tratamento, em 32 pacientes divididos em 2 grupos: terapia dupla com interferon peguilado (IFN-PEG) e ribavirina e tripla com IFN-PEG, ribavirina e telaprevir. RESULTADOS A redução da QVRS foi maior em pacientes em terapia tripla quando comparados àqueles tratados com duas drogas, sendo o momento mais crítico a 12ª semana em ambos os grupos. Após a retirada do telaprevir, o grupo terapia tripla melhorou de modo significativo os escores de QVRS. Ansiedade e depressão no pré-tratamento, status empregatício e raça se mostraram relacionados à redução da QVRS. CONCLUSÃO Pacientes submetidos à terapia dupla e tripla apresentam redução dos índices de QVRS, mas a adição do telaprevir confere uma queda mais expressiva.

Lectin, hemolysin and protease inhibitors in seed fractions with ovicidal activity against Haemonchus contortus / Lectina, hemolisina e inibidores de protease em frações de sementes com atividade ovicida contra Haemonchus contortus

Bioactive molecules of plant species are promising alternatives for the chemical control of gastrointestinal nematodes in ruminants. Extracts of native and exotic seed species from Brazil's semi-arid region were tested in vitro in an egg hatch assay and the bioactivity of their proteins was investigated. Each seed species was subjected to three extractions with three types of solvents. All the seeds showed ovicidal activity, which varied according to the solvents. Higher ovicidal activity was found in the molecule fractions of low molecular weight (<12 kDa) for Albizia lebbeck, Ipomoea asarifolia, Jatropha curcas, Libidibia ferrea, Moringa oleifera and Ricinus communis (P<0.05, Bonferroni test). The two fractions of Crotalaria spectabilis showed the same ovicidal activity (P>0.05, Bonferroni test). Hemagglutinating activity was detected in the fractions of C. spectabilis and M. oleifera fractions, hemolysin activity in the A. lebbeck and M. oleifera fractions, serine protease inhibitory activity in the A. lebbeck, I. asarifolia, J. curcas, M. oleifera and R. communis fractions, cysteine protease inhibitor activity in the M. oleifera fraction, and no protein activity in the L. ferrea fraction. The results of this work reveal new plant species with a potential for use in controlling nematode parasites in goats, thus opening a new field of research involving plant protein molecules with ovicidal properties.

Moléculas bioativas de espécies vegetais são alternativas promissoras ao controle químico dos nematoides gastrintestinais em ruminantes. Extratos de sementes de espécies nativas e exóticas do Semiárido Brasileiro foram testados in vitro em ensaio de eclosão de ovos e investigada a natureza proteica da bioatividade. Três extrações com três solventes foram feitas para cada semente estudada. Todas as sementes apresentaram atividade ovicida, variando com o solvente utilizado. Maior taxa de inibição da eclosão concentrou-se nas frações de moléculas de baixa massa molecular (<12 kDa) para Albizia lebbeck, Ipomoea asarifolia, Jatropha curcas, Libidibia ferrea, Moringa oleifera e Ricinus communis (P<0,05, teste de Bonferroni). Crotalaria spectabilis mostrou atividade nas duas frações, sem diferença entre elas (P>0,05, teste de Bonferroni). Observou-se atividade hemaglutinante nas frações de C. spectabilis e M. oleifera, de hemolisina em A. lebbeck e M. oleifera, de atividade inibidora de protease da serina em A. lebbeck, I. asarifolia, J. curcas, M. oleifera e R. communis, de atividade inibidora de protease da cisteína em M. oleifera e nenhuma atividade proteica na fração de L. ferrea. Os resultados revelaram novas espécies botânicas com potencial de controle de nematoides em caprinos e um novo campo de pesquisa, o estudo de moléculas de origem proteica com atividade ovicida.

Mutações de resistência aos Inibidores de Protease em pacientes com Hepatite C crônica no Brasil / Resistance-associated variants to Hepatitis C virus Protease Inhibitors in naïve DAA patients in Brazil

A resistência viral aos inibidores de protease aparece rapidamente, pois essas cepas resistentes já existem naturalmente na população de quasispécies do vírus, emergindo como cepas mais prevalentes em relação às cepas selvagens quando o vírus sofre a pressão da droga. Esta seleção de cepas resistentes (RAVs) tem um papel im¬portante na falha terapêutica dessa classe de droga. Análise por sequenciamento direto em pacientes não tratados têm demonstrado diversas RAVs aos inibidores de protease (substituições nas posi¬ções V36, T54, V55, Q80, R155, D168 e V170). As mutações nas posições R155K e A156T da região NS3 estão associadas à alta resistência aos inibidores de protease. Dessa forma, os antivirais de ação direta (DAA) não podem ser utilizados em monoterapia. Aparentemente, existe uma diferença geográfica na distribuição dessas variantes de resistência. Nas populações europeia e america¬na, por exemplo, a variante de resistência na posição Q80K no ge¬nótipo 1a, que confere resistência ao simeprevir, foi encontrada em 25% a 35%. No entanto, na população brasileira uma frequência em torno de 1,8% de RAVs na posição Q80K, em três estudos, dois em VHC monoinfectados e outro em co-infectados VHC-HIV. O conhecimento da distribuição dos subgenótipos e do perfil de mutações nas diversas populações em todo o mundo vai se tornar importante na confecção de guidelines regionais, que seguramente terão suas particularidades de acordo com o perfil de cada região, no intuito de atingirmos máxima eficácia dos diferentes esquemas terapêuticos

Viral resistance to protease inhibitors appear quickly because these resistant strains occur naturally in the virus quasispecies population, emerging as the most prevalent strains compared to wild type strains when the virus is under drug pressure. This selection of resistant strains (RAVs) has an important role in therapeutic failure of this class of drug. Analyses by direct sequencing in untreated patients have shown various RAVs to protease inhibitors (substitutions at positions V36, T54, V55, Q80, R155, A156, D168 and V170). Mutations at positions R155K and A156T on NS3 region are associated with high resistance to protease inhibitors. Thus, the direct action antivirals (DAA) may not be used as monotherapy. Apparently, there is a geographical difference in the distribution of these variants of resistance worldwide. In European and American HCV population for example, resistance variants in the position Q80K genotype 1a, which confers resistance to simeprevir was found in 25% to 35% of patients. However, in the Brazilian population the Q80K mutation was found at a frequency of around 1.8%, in three studies, two in HCV monoinfected and another in coinfected HIV-HCV patients. The distribution of this mutation profile in different populations around the world will become important in the preparation of regional guidelines, which surely will have their particularities according to the HCV subtyping distribution and mutation profile of each region in order to achieve maximum effectiveness of different treatment regimens

Baixa digestibilidade proteica e presença de antinutricionais em produtos tipo mix de cereais / Low protein digestibility and anti-nutritional factors in cereal mix like products

Products composed of cereal mixes and other ingredients such as guarana, gelatin and cocoa powders; yeast; and soybean, flaxseed and sesame extracts have presented increased sales while receiving ever-growing criticism. Amongst the ingredients that could compose this cereal mix, most are of vegetable origin, wholegrain and not thermally processed. Therefore, they may present anti-nutritional factors, which are recognized to harm the bioavailability of nutrients, such as proteins. In this study, we aimed to evaluate the protein quality of these products, sold in the municipality of Uberaba, Brazil. The protein digestibility, tannins and trypsin inhibitors of the 14 samples were assessed. All samples showed trypsin inhibition activity and tannins. These results suggest that those products present low potential for nutrient utilization, especially with regards to proteins.

Productos compuestos por mezclas de cereales y otros ingredientes, como guaraná en polvo, gelatina en polvo, cacao en polvo, levadura de cerveza, extracto de soja, linaza y ajonjolí, presentan creciente comercialización, al mismo tiempo que aumentan los cuestionamientos al respecto. Estos productos están compuestos de variados ingredientes, la mayoría de origen vegetal, integral y sin procesamiento térmico previo, y podrían presentar antinutricionales, reconocidamente capaces de perjudicar la biodisponibilidad de nutrientes, tales como las proteínas. Este estudio evaluó la calidad proteica de productos listos para el consumo, compuestos por mezclas de cereales y otros componentes, comercializados en la ciudad de Uberaba-MG, determinando sus niveles antinutricionales y su digestibilidad proteica in vitro. Todas las muestras analizadas presentaron inhibición en la actividad de tripsina y de taninos. Las muestras presentaron muy claramente bajos valores de digestibilidad proteica in vitro. Los resultados sugieren que estos productos presentan bajo potencial de utilización de sus nutrientes, muy especialmente con respecto a sus proteínas.

Misturas de cereais e outros ingredientes, como guaraná em pó, gelatina em pó, cacau em pó, levedo de cerveja, extrato de soja, linhaça e gergelim, vêm apresentando crescente comercialização, concomitantemente com crescentes questionamentos a seu respeito. Dentre os ingredientes variados que podem compor estes produtos, a maioria é de origem vegetal, integral e sem processamento térmico prévio, e poderiam apresentar antinutricionais, reconhecidamente capazes de prejudicar a biodisponibilidade de nutrientes, como proteínas. Este trabalho buscou avaliar a qualidade proteica de produtos prontos para o consumo, compostos por misturas de cereais e outros componentes, comercializados no município de Uberaba-MG, determinando seus teores de antinutricionais e sua digestibilidade proteica in vitro. Todas as amostras analisadas apresentaram atividade de inibição de tripsina e teores de taninos, e baixa digestibilidade in vitro.

Presença de inibidores de proteases em amostras comerciais de “faseolaminas” utilizadas como bloqueadores de carboidratos e os riscos à saúde / Occurrence of proteases inhibitors in commercial samples of “phaseolamins” used as carbohydrate blockers and the health risks

Foi investigada a veiculação de inibidores de proteases, concomitante ao consumo de “faseolamina”, cuja ingestão diária e de maneira prolongada poderia estar associada ao risco no desenvolvimento de alterações morfológicas e metabólicas de pâncreas. Dez amostras foram obtidas em farmácias de manipulação no município de Uberaba – MG, as quais são comercializadas na forma de cápsulas como “faseolamina”e uma como “farinha de feijão branco”, além de amostra de farinha preparada a partir da trituração de feijões brancos (Phaseolus vulgaris) obtidos comercialmente, sem qualquer processamento. Estas amostras foram analisadas efetuando-se a determinação de atividade de inibidores de tripsina, a determinação de proteínas totais e de atividade de inibição de amilase. Todas as amostras estudadas apresentaram atividades de inibição de tripsina, porém com baixa ou mesmo inexistente inibição de amilase; e em algumas amostras foi detectada concentração de proteínas muito inferior ao esperado. Uma vez observada a presença de atividade de inibição de tripsina em todas as amostras estudadas, e pela inexistência de níveis seguros de consumo estabelecidos para o ser humano, e ainda baseando-se nos trabalhos sobre associação de ingestão prolongada destes inibidores com alterações de atividade pancreática, o consumo destes “bloqueadores de carboidratos” deveria ser melhor controlado.

This study aimed at verifying the risk in developing the metabolic and morphological changes inpancreas, owing to the use of daily and prolonged consumption of protease inhibitors in conjunctionwith “phaseolamine”. Ten samples were obtained from drugstores in the city of Uberaba – MG, soldas “phaseolamine” and one known as “white bean flour”, and also one flour sample produced fromcommercial white beans (Phaseolus vulgaris) without any processing. These samples were analyzedby determining the activity of trypsin inhibitors, the total protein and the amylase inhibition activity.Trypsin inhibition activity was found in all of analyzed samples; however, the amylase inhibition activitywas low, and in some samples the protein concentration was much lower than expected. Seeing that thetrypsin inhibitory activity was detected in all of analyzed samples, and considering that the prolongedingestion of these inhibitors might cause activity changes in pancreas, the consumption of these types of“carbohydrate blockers” should be deeply discussed, since the safe amounts of these compounds have notbeen established for humans consumption yet.

Efeito in vitro de inibidores de proteases sobre trofozoítos de Giardia duodenalis / In vitro effect of protease inhibotors on trophozoites of giardia duodenalis

Entre os alvos mais promissores para o desenvolvimento de novos agentes antiparasitários, destacam-se as proteases que nos protozoários participam de processos metabólicos e fisiológicos, atuando como importantes fatores de virulência. Como a atividade dessas moléculas pode ser controlada por inibidores específicos, essas substâncias têm sido avaliadas quanto ao potencial terapêutico em diferentes infecções parasitárias, inclusive por Giardia. O presente estudo foi desenvolvido com o objetivo de avaliar o efeito in vitro dos inibidores de cisteína (IAA e E-64) e serina-proteases (antipaina, leupeptina e TLCK) sobre o crescimento, aderência, viabilidade e ultraestrutura de trofozoítos de cepa de Giardia isolada e axenizada em Botucatu. Para isso, trofozoítos foram incubados em meio contendo os inibidores a diferentes concentrações durante 24, 48 e 72 horas. Nos ensaios de crescimento e aderência, o número de trofozoítos foi estimado a partir de contagens em hemocitômetro, enquanto que a viabilidade celular e as alterações ultraestruturais foram avaliadas, respectivamente, pelo método de redução do MTT e por microscopia eletrônica de transmissão. De acordo com as observações feitas no presente estudo, todos os inibidores de proteases apresentaram efeito sobre o crescimento, aderência e viabilidade dos trofozoítos. Entretanto, melhor desempenho quanto à capacidade de reduzir os parâmetros avaliados foi demonstrado nos ensaios com os inibidores de cisteína-proteases, especialmente a IAA. As maiores porcentagens de inibição do crescimento e aderência e as menores taxas de viabilidade foram observadas após o tratamento com IAA...

The quest for new antiparasitic alternatives has led researchers to base their studies on insights into biology, host-parasite interactions and pathogenesis. In light of this, the proteolytic enzymes or proteases have excited the researcher’s interest, once they have been identified as important virulence factors as well as potential chemotherapeutic targets in parasites. Considering that proteases are naturally regulated by specific inhibitors, these substances have been evaluated for their therapeutic potential in parasitic infections including Giardia. In this way, we proposed to evaluate the in vitro effect of inhibitors of cysteine (IAA and E-64) and serine proteases (antipain, leupeptin and TLCK) on growth, adherence, viability and ultrastructure of Giardia trophozoites of a strain isolated and axenized in Botucatu. For this, trophozoites were incubated in medium containing the inhibitors at various concentrations for 24, 48 and 72 hours. In growth and adherence assays, the number of trophozoites was estimated microscopically in a haemocytometer, whereas cell viability and ultrastructural changes were evaluated, respectively, by the method of MTT and transmission electron microscopy. In this study, all protease inhibitors showed effect on growth, adherence and viability of trophozoites. However, better performance in their ability to reduce the parameters assessed was demonstrated in experiments with cysteine proteases inhibitors, especially IAA...

Estudo da reatividade vascular em portadores de HIV com e sem uso de inibidor de protease / Study of vascular reactivity in HIV patients whether or not receiving protease inhibitor

FUNDAMENTO: Considerando o alto número de pacientes infectados por HIV em uso de antirretrovirais, evoluindo com alteração da função endotelial e aterotrombose, levando ao alto custo médico social, é importante identificar mecanismos fisiopatológicos envolvidos com a função endotelial em portadores de HIV, para que, precocemente, possamos intervir e evitar a progressão da doença. OBJETIVO: Avaliar a função endotelial pela vasodilatação endotélio dependente e independente em pacientes HIV positivo e em grupo controle. MÉTODOS: O estudo avaliou 27 pacientes HIV positivo e 16 do grupo controle. A avaliação da função endotelial foi realizada por meio da vasodilatação da artéria braquial endotélio dependente (hiperemia reativa) e independente (nitroglicerina SL). RESULTADOS: Pacientes HIV positivo em uso de inibidor de protease (IP) apresentaram vasodilatação endotélio independente significativamente menor que os subgrupos HIV negativo (p = 0,020) e HIV positivo sem uso de IP (p = 0,034). A variação do diâmetro da artéria braquial durante hiperemia reativa não apresentou significância estatística em qualquer subgrupo. A análise de regressão linear múltipla mostrou que apenas o IP estava associado ao delta relativo da reatividade braquial pelo vasodilatador, nos pacientes HIV positivo, aos 60 e 90 segundos. CONCLUSÃO: Os pacientes HIV positivo em uso de IP apresentam disfunção endotélio independente quando comparados a pacientes HIV positivo que não fazem uso de IP e a um grupo controle.

BACKGROUND: A great number of HIV-infected patients using antiretroviral drugs develop endothelial dysfunction and atherothrombosis, which lead to a high medical and social burden. Thus, it is important to identify pathophysiological mechanisms involved with the endothelial function in these patients, so that early intervention can be made to avoid disease progression. OBJECTIVE: To evaluate endothelial function using endothelium-dependent and independent vasodilation in HIV-positive patients and in a control group. METHODS: A total of 27 HIV-positive patients and 16 controls were evaluated. Endothelium-dependent (reactive hyperemia) and independent (SL nitroglycerine) vasodilation of the brachial artery was used to evaluate the endothelial function. RESULTS: HIV-positive patients receiving protease inhibitors (PI) showed significantly lower endothelium-independent vasodilation than the HIV-negative (p=0.020) and HIV-positive without PI (p=0.034) subgroups. The change in brachial artery diameter during active hyperemia was not statistically significant in any subgroup. Multiple linear regression analysis showed that only PI was associated with the relative delta of brachial reactivity to vasodilator in HIV-positive patients at 60s and 90s. CONCLUSION: HIV-positive patients receiving PI presented endothelium-independent dysfunction when compared to HIV-positive patients not receiving PI and to the control group.

What's the importance of peptidases in cancer?: [review] / Qual é a importância das peptidases em câncer?: [revisão]

A synonym for a successful tumor spread is a productive invasive cell migration, a process by which the extracellular matrix plays the role of substrate for cells to move and reach a secondary site. Peptidases participate actively in this process to degrade the extracellular matrix. The activity of these enzymes is regulated by inhibitors, activators and receptors. However, cancer occurs in a breach of the balance of proteolytic-antiproteolytic activity. The peptidases, enzymes that hydrolyze peptide bonds of proteins, can act directly by degrading the components of the extracellular matrix or indirectly by activating other peptidases, in a process that may also generate bioactive fragments, interact with cell surface receptors, and be involved in the angiogenic process. The modification and remodeling of the extracellular matrix caused by peptidases modify the anchoring mediated by integrins, focal adhesion and architecture of the cytoskeleton, and direct signaling molecules that can affect gene expression and influence some behavioral aspects, such as proliferation, survival, differentiation and mobility. Recently, some studies showed an inverse correlation between the low expression of peptidases and increased potential for tumor development. Thus, despite offering an excellent alternative of a more effective and targeted cancer treatment, protease inhibitors should be specific, administered at the correct time with the aid of biomarkers and act locally, and finally, their activity should not be prolonged to the point of interfering with the activity of peptidases when they are, for example, being used in a process of remodeling.

Um sinônimo para o sucesso da disseminação do tumor é uma produtiva migração celular invasiva, um processo pelo qual a matriz extracelular possui papel de substrato para as células se moverem e atingirem um sítio secundário. Para degradar a matriz extracelular, as peptidases participam ativamente deste processo. A atividade destas enzimas é regulada por inibidores, ativadores e receptores. Entretanto, no câncer ocorre uma quebra do balanço da atividade proteolítica-antiproteolítica. As peptidases, enzimas que clivam ligações peptídicas, podem atuar de forma direta ao degradar componentes da matriz extracelular ou de forma indireta, ao ativar outras peptidases a gerar fragmentos bioativos, interagir com receptores da superfície celular, e participar no processo angiogênico. A modificação e o remodelamento da matriz extracelular causadas por peptidases modificam a ancoragem mediada por integrinas, a adesão focal e a arquitetura do citoesqueleto direcionam moléculas de sinalização que podem afetar a expressão gênica e influenciar no comportamento como proliferação, sobrevivência, diferenciação, e mobilidade. Recentemente, alguns trabalhos demonstraram uma correlação inversa entre a baixa expressão de peptidases e o aumento do potencial do desenvolvimento do tumor. Desta forma, apesar de oferecerem uma excelente alternativa mais efetiva e direcionada para o tratamento do câncer, os inibidores de peptidases devem ser específicos, administrados no tempo correto com o auxílio de biomarcadores e atuar localizadamente.

Moringa oleifera: bioactive compounds and nutritional potential: [review] / Moringa oleifera: compostos bioativos e potencialidade nutricional: [revisão]

This work aims to review the nutritional properties of the Moringa oleifera tree, emphasizing its main constituents and nutritional applications for humans and animals. Moringa oleifera (Moringaceae) is a cosmopolitan tree that grows in many tropical countries showing uncountable folk uses due to its various nutritional and pharmacological applications. The young leaves, flowers and pods are common vegetables in the Asian diet. All parts of this plant are renewable sources of tocopherols (γ and α), phenolic compounds, β-carotene, vitamin C and total proteins, including the essential sulfur amino acids, methionine and cysteine. The seed protein and fat contents are higher than those reported for important grain legumes and soybean varieties, respectively. Unsaturated fatty acids, especially oleic acid, carbohydrates and minerals are present in the seed in reasonable amounts. In general, there are low concentrations of antinutritional factors in the plant, although the seeds possess glucosinolates (65.5µmol/g dry matter), phytates (41g/kg) and hemagglutination activity while the leaves have appreciable amounts of saponins (80g/kg), besides low quantity of phytates (21g/kg) and tannins (12g/kg). Taking into consideration the excellent nutritional properties, the low toxicity of the seeds and the excellent ability of the plant to adapt to poor soils and dry climates, Moringa oleifera can be an alternative to some leguminous seeds as a source of high-quality protein, oil and antioxidant compounds and a way to treat water in rural areas where appropriate water resources are not available.

O objetivo deste trabalho é fazer uma revisão sobre as propriedades nutricionais da planta Moringa oleifera, enfatizando seus principais constituintes e suas aplicações nutricionais para o homem e os animais. Moringa oleifera é uma planta que cresce em muitos países tropicais, possuindo inúmeros usos populares devido às suas aplicações nutricionais e farmacológicas. Na Ásia, suas folhas, flores e vagens são geralmente consumidas como vegetais. Todas as suas partes são fontes renováveis de compostos fenólicos, tocoferóis (γ e α), β-caroteno, vitamina C e proteínas totais, inclusive os aminoácidos essenciais sulfurados metionina e cisteína. Os conteúdos de proteínas e óleo nas sementes de Moringa oleifera são mais elevados que aqueles encontrados em legumes e em algumas variedades de soja, respectivamente. Ácidos graxos insaturados, principalmente o ácido oléico, carboidratos e minerais estão presentes nas sementes em quantidades razoáveis. No geral, a planta possui baixas concentrações de fatores antinutricionais, embora as sementes possuam glucosinolatos (65,5µmol/g), fitatos (41g/kg) e atividade hemaglutinante, enquanto as folhas têm apreciáveis quantidades de saponinas (80g/kg), além de fitatos (21g/kg) e taninos (12g/kg). Levando em consideração as excelentes propriedades nutricionais, a baixa toxicidade das sementes e a excelente habilidade da planta de se adaptar a solos pobres e a climas áridos, a Moringa oleifera pode ser uma alternativa ao consumo de sementes leguminosas, como fonte de proteínas de alta qualidade, de óleo e de compostos antioxidantes. Pode ser usada, ainda, como uma maneira de tratar água em áreas rurais onde recursos hídricos adequados não estão disponíveis.

BTCI enhances guanylin-induced natriuresis and promotes renal glomerular and tubular effects

Guanylin and uroguanylin are small cysteine-rich peptides involved in the regulation of fluid and electrolyte homeostasis through binding and activation of guanylyl cyclases signaling molecules expressed in intestine and kidney. Guanylin is less potent than uroguanylin as a natriuretic agent and is degraded in vitro by chymotrypsin due to unique structural features in the bioactive moiety of the peptide. Thus, the aim of this study was to verify whether or not guanylin is degraded by chymotrypsin-like proteases present in the kidney brush-border membranes. The isolated perfused rat kidney assay was used in this regard. Guanylin (0.2 µM) induced no changes in kidney function. However, when pretreated by the black-eyed pea trypsin and chymotrypsin inhibitor (BTCI - 1.0 µM; guanylin - 0.2 µM) it promoted increases in urine flow (deltaUF of 0.25 ± 0.09 mL.g-1/min, P < 0.05) and Na+ excretion ( percent delta ENa+ of 18.20 ± 2.17, P < 0.05). BTCI (1.0 µM) also increased percentENa+ (from 22.8 ± 1.30 to 34.4 ± 3.48, P < 0.05, 90 minutes). Furthermore, BTCI (3.0 µM) induced increases in glomerular filtration rate (GFR; from 0.96 ± 0.02 to 1.28 0.02 mL.g-1/min, P < 0.05, 60 minutes). The present paper strongly suggests that chymotrypsin-like proteases play a role in renal metabolism of guanylin and describes for the first time renal effects induced by a member of the Bowman-Birk family of protease inhibitors.

Guanilina e uroguanilina são peptídeos pequenos, ricos em cisteína, envolvidos na regulação da homeostase de fluidos e eletrólitos através da ligação e ativação da guanilato ciclase expressa no intestino e nos rins. A guanilina é menos potente do que a uroguanilina como agente natriurético e é degradada in vitro pela quimiotripsina devido a características estruturais únicas no domínio bioativo do peptídeo. Portanto o objetivo deste trabalho foi verificar se a guanilina é degradada por proteases tipo quimiotripsina, presentes na membrana da borda em escova dos rins. Para esta investigação, foi usado o modelo do rim isolado de rato perfundido. A Guanilina (0,2 µM) não induziu mudanças na função renal. Entretanto, quando pré-tratada com inibidor de tripsina e de quimiotripsina de black-eyed pea (BTCI - 1,0 µM; guanilina - 0,2 µM) promoveu um aumento no fluxo urinário (deltaUF de 0,25 ± 0,09 mL.g-1/min, P < 0,05) e na excreção de Na+ ( por centoDENa+ de 18,20 ± 2,17, P < 0,05). BTCI (1,0 µM) também aumenta por centoENa+ (de 22,8 ± 1,30 a 34,4 ± 3,48, P < 0,0590 minutos). Além disto, BTCI (3,0 µM) induziu um aumento da taxa de filtração glomerular (GFR; de 0,96 ± 0,02 para 1,28 ± 0,02 mL.g-1/min, P < 0,05, 60 minutos). O presente trabalho sugere fortemente que proteases semelhantes à quimiotripsina desempenham um papel no metabolismo renal de guanilinas e descreve, pela primeira vez, os efeitos renais induzidos por um membro da família de inibidores de proteases do tipo Bowman-Birk.